飼料中霉菌毒素的種類及檢測方法

飼料及原料被霉菌污染后，當(dāng)達(dá)到霉菌生長繁殖所需要的適宜條件時，霉菌就會快速繁殖并產(chǎn)生霉菌毒素。飼料霉變后，不但會降低或喪失營養(yǎng)價值：而且被動物攝食后，會抑制動物免疫機(jī)能、降低生產(chǎn)和繁殖性能等，給畜牧業(yè)帶來嚴(yán)重危害。其次，霉菌毒素在畜禽產(chǎn)品中殘留，嚴(yán)重影響畜禽產(chǎn)品品質(zhì)；被人類食用后，給人類健康帶來嚴(yán)重威脅。因此加大對霉菌毒素的研究具有十分重要的意義。

l 霉菌毒素的種類及危害

按照霉菌種屬分類，主要分為：曲霉菌屬，主要產(chǎn)生黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等；青霉菌屬主要產(chǎn)生赭曲霉毒素、展青霉素等；鐮刀菌屬主要產(chǎn)生玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、T-2毒素、煙曲霉毒素等：麥角菌屬主要產(chǎn)生麥角毒素。其次同一種毒素也可能由不同種屬霉菌產(chǎn)生，因為每種霉菌可能會因條件不同而產(chǎn)生不同種類毒素。

按照霉菌毒素產(chǎn)生的條件，可分為倉儲毒素和田間毒素；顧名思義，倉儲毒素主要在農(nóng)作物儲存過程中產(chǎn)生的霉菌毒素，主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等；田間毒素主要是飼料原料在田間生長及收割過程中產(chǎn)生的霉菌毒素，主要有玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、煙曲霉毒素、T-2毒素、麥角毒素等。

霉菌毒素種類多達(dá)數(shù)百種，對畜禽危害比較嚴(yán)重且報道較多主要有黃曲霉毒素B₁(AFB₁)、赭曲霉毒素A(0TA)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、單端孢霉烯族毒索、伏馬菌素(FB)、等。

黃曲霉毒素B₁(AFB₁)：

黃曲霉毒素是一類劇毒化學(xué)物質(zhì)。主要由黃曲霉菌和寄生曲霉菌產(chǎn)生。其毒性最大，也是研究和報道最多的霉菌毒素之一，能與動物DNA、RNA等結(jié)合，從而抑制DNA合成；其次破壞動物免疫系統(tǒng)，損害動物肝臟。動物中毒后，輕則食欲減退，生產(chǎn)性能下降，重則導(dǎo)致死亡。

赭曲霉毒素A(OTA)：

赭曲霉毒素，主要由曲霉菌屬和青霉屬菌產(chǎn)生；是抑制蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵酶，其可降低蛋白質(zhì)的合成效率，進(jìn)而影響DNA和RNA的合成。主要損傷動物腎臟及免疫系統(tǒng)，并能導(dǎo)致癌變和畸形。動物易渴、尿頻、生長遲緩和飼料利用率降低，臨床癥狀還有腹瀉、厭食和脫水。

玉米赤霉烯酮(ZEN)：

玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮由鐮刀菌屬產(chǎn)生，是一種植物源雌激素。主要對動物生殖系統(tǒng)有影響。家畜對此敏感性較高，相關(guān)研究表明，此中毒素會引起母豬不孕、流產(chǎn)、假發(fā)情、死胎、公豬精液質(zhì)量下降等；家禽對此敏感性相對較低。

單端孢霉烯族毒素：

單端孢霉烯族毒素主要由鐮刀菌屬產(chǎn)生，是一大類倍半萜烯化合物，其中T-2毒素和嘔吐毒素(DON)是此類毒素的典型代表。除對動物肝、腎具有損傷外，還對消化系統(tǒng)具有很大影響。動物中毒臨床癥狀表現(xiàn)為食欲減退、胃腸炎癥、出血、嘔吐、免疫機(jī)能下降等。

伏馬菌素(FB)：

伏馬菌素是一類由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結(jié)構(gòu)類似的雙酯化合物，由鐮刀茵屬產(chǎn)生。其中此類毒素中，毒性最強(qiáng)是FB₁。對動物肝、腎、免疫系統(tǒng)都有很大損傷作用，會導(dǎo)致動物生產(chǎn)性能下降甚至死亡。

其他：

除以上報道比較集中的幾種個毒素外，如煙曲霉毒素、麥角毒素等對動物生產(chǎn)力、繁殖性能、免疫系統(tǒng)等也具有很大危害，其中煙曲霉毒素在飼料中也比較常見。據(jù)最近飼料及原料霉菌毒素污染調(diào)查顯示，飼料中一般不會單獨存在，常常幾種毒素同時存在，且會產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步加大對動物健康及生產(chǎn)性能的影響。

2 霉菌毒素檢測方法

霉菌毒素的檢測方法包括目測法、實驗室檢測法及質(zhì)譜檢測法等。

目測法：

飼料出現(xiàn)霉變時，輕則會出現(xiàn)發(fā)熱、異昧、色澤變暗，飼料結(jié)塊，嚴(yán)重者腐爛變質(zhì)。在飼料儲藏期間一定要定期查看，早發(fā)現(xiàn)早處理。

實驗窒檢測法：

霉菌毒素的檢測一般分為萃取、凈化和測定三個步驟。首先要使用萃取試劑對樣品毒素進(jìn)行萃取，凈化處理后進(jìn)行檢測。常用的萃取劑有氯仿-水或乙晴-水等：凈化方法一般采用薄層法、反相分配柱法、免疫親和柱法等：測定方法包括高效液相色譜法(HPLC)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、薄層色譜法(TLC)等。

高效液相色譜法(HPLC)：

HPLC可以采用柱前柱后衍生，靈敏度較高，該法回收率可達(dá)80％以上。

酶聯(lián)免疫吸附測定方法(ELISA)：

此方法主要用于檢測AFB₁，一般可用于AFB₁的快速定性或定量分析。其優(yōu)點是檢驗快速，適合量多的樣品檢測；但有時受其它物質(zhì)影響會出現(xiàn)假陽性，需用其他方法進(jìn)一步確認(rèn)。

薄層色譜法：

本法適用于黃曲霉毒素、赫曲霉毒素、赤霉烯酮類等多種霉菌毒素的定性和定量檢測。薄層色譜法檢驗結(jié)果比較準(zhǔn)確，但該方法檢驗步驟多，耗時長，一般用于特殊情況下的精確驗證檢測

質(zhì)譜法：

質(zhì)譜法是最近幾年新興的檢測方法，是霉菌毒素檢測領(lǐng)域最準(zhǔn)確可靠的檢測方法，也是目前采用的主要檢測方法�，F(xiàn)在常用的質(zhì)譜法包括液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法、基質(zhì)輔助激光解析電離一質(zhì)譜聯(lián)用法、離子遷移光譜技術(shù)等�，F(xiàn)在，能直接讀取定量數(shù)據(jù)的手持式檢測儀也已經(jīng)研制成功并開始商業(yè)化生產(chǎn)；這種檢測方法所需成本較低，便于攜帶，可現(xiàn)場操作，非常適合對原料及飼料中霉菌毒素含量的常規(guī)檢測。

其他：

除以上方法外，霉菌毒素檢測方法還有鏡檢法、氣相色譜法、微柱法等；傳統(tǒng)的快速檢測法還有皮膚反應(yīng)法、皮下注射法篩查法、抑菌試驗等。

3 小結(jié)

霉菌毒素對人類和畜禽的危害已經(jīng)受到人們的高度重視，如何快速精確檢測霉菌毒素的種類及含量，并及時采取防范措施，仍然是科技工作者急需解決的熱點問題。現(xiàn)在已經(jīng)報道的檢測方法各有優(yōu)缺點，側(cè)重的霉菌毒素種類及精確度也有差別。相信隨著科技的進(jìn)步，檢測精度更高、操作更簡便、價格更加低廉的方法會替代傳統(tǒng)的檢測方法。