“羅非魚無乳鏈球菌病免疫防控技術(shù)研究”項(xiàng)目通過驗(yàn)收

　　

　　該項(xiàng)目超額完成了任務(wù)書規(guī)定的研究?jī)?nèi)容和技術(shù)考核指標(biāo)。一是克隆了羅非魚無乳鏈球菌sip基因，構(gòu)建了sip基因原核表達(dá)工程菌1株（sip-pET32a(+)）,并在小鼠和羅非魚體內(nèi)進(jìn)行該重組蛋白的免疫活性分析，經(jīng)免疫保護(hù)試驗(yàn)表明其具有較好的免疫效果；二是以重組表達(dá)的羅非魚無乳鏈球菌SIP融合蛋白為抗原，制備抗SIP融合蛋白單克隆抗體細(xì)胞2株和兔多克隆抗體，建立了羅非魚無乳鏈球菌雙抗體夾心ELISA快速檢測(cè)方法，檢測(cè)時(shí)間少于3.5h，精確度達(dá)98.33%以上；三是制備了羅非魚IgM 單克隆抗體細(xì)胞3株和兔多克隆抗體，建立了“捕獲ELISA” 方法，進(jìn)行羅非魚免疫應(yīng)答水平監(jiān)測(cè)和疫苗免疫效果評(píng)價(jià)；四是測(cè)定了羅非魚攝食后消化道的胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶4種消化酶活性動(dòng)態(tài)變化，揭示了食糜蛋白成份主要在后腸、淀粉成份主要在中腸、脂肪成份主要在前腸的消化現(xiàn)象，為羅非魚口服疫苗飼料的研發(fā)提供了消化生理的理論基礎(chǔ)；五是制備了羅非魚無乳鏈球菌sip基因工程微膠囊口服疫苗，其實(shí)驗(yàn)保護(hù)率為66.67%，并在107畝羅非魚養(yǎng)殖池進(jìn)行了應(yīng)用示范。同時(shí)，項(xiàng)目還保存了細(xì)胞株1株、菌株2株。

　　

　　專家組同意項(xiàng)目通過驗(yàn)收，并一致認(rèn)為該研究成果總體水平居國(guó)內(nèi)領(lǐng)先。