紫外分光光度法檢測飼料級林可霉素預混劑的含量

紫外分光光度法檢測飼料級林可霉素預混劑的含量

陳麗  馮建文  譚寶玲 陳玲

（廣東溫氏食品集團有限公司  527439）

摘要：目的：測定飼料級林可霉素預混劑的含量。 方法：采用紫外分光光度法，選定林可霉素的波長為380nm。 結果：線性范圍26.6～199.3μg/ml（R²=0.9996）,平均回收率為95.70％，RSD為2.16%（n＝6）。結論：本法快速，簡便，結果準確。

關鍵詞：紫外分光光度法  林可霉素  含量

林可霉素（lincomycin）是一種高效廣譜抗生素。于1962年由美國人Mason等首先從鏈霉菌林可變種培養(yǎng)液中獲得，從此獲得廣泛應用。林可霉素的分子式為C₁₈H₃₄N₂O₆S，分子量為406.56。林可霉素對革蘭氏陽性菌有較強的抑菌作用，特別是對鏈球菌、金黃色葡萄球菌及厭氧菌的抗菌作用尤其為明顯，在許多感染癥的治療中療效顯著^[1]。林可霉素的預混劑添加到飼料中，可促進雞的生長發(fā)育，節(jié)約飼料成本，提高經濟效益，同時還具有預防球蟲病的作用。但要把握添加量，添加量過多會造成飼料的浪費和產生耐藥性，過少又達不到良好的效果和經濟效益。

林可霉素的測定方法有很多，其中常用的主要有生物效價法、旋光法、高效液相色譜法以及分光光度法。生物效價法雖然測定準確，但是其測定周期長而且操作復雜無法達到快速的要求；旋光法則分辨能力較差，準確性較低。高效液相色譜法雖然準確，但成本昂貴，操作繁瑣。本文研究了采用紫外分光光度法檢測預混料中的林可霉素的含量，操作簡單，快速。

1.   儀器與試劑

  UV-7502 PC 紫外分光光度計，超聲波發(fā)生器AS1320

  鹽酸林可霉素標準品(含量85.4％，由中國藥品生物制品檢定所提供)

鹽酸1mol/L  雙蒸水

PdCl₂（0.02mol/L的鹽酸溶液，由上海潤捷化學試劑有限公司提供）

PdCl₂,鹽酸均為分析純。

2.   實驗內容

2.1 林可霉素吸收波長的確定

根據文獻報道，林可霉素與PdCl₂在酸性條件下可以形成有色的絡合物^[1]的絡合物隨林可霉素的濃度增大而顏色加深，因此可以用分光光度法進行定量測定飼料中林可霉素的含量。

將鹽酸林可霉素標準品配成300μg/ml的水溶液。分別取15ml林可霉素溶液和1.6ml的PdCl₂溶液于25ml容量瓶中，加鹽酸定容至刻度，搖勻。以同PdCl₂濃度的溶液作空白溶液。靜置30min后，在波長190-800nm范圍內進行掃描。結果表明，在波長為380nm±1nm處有最大吸收。因此，選擇380nm作為測定波長。如圖1所示。

圖1  鹽酸林可霉素紫外掃描圖譜

2.2 林可霉素標準曲線的繪制

標準儲備液  準確稱取林可霉素對照品38.9mg于100ml棕色容量瓶中，加水溶解并定容至刻度。該標準溶液含林可霉素的濃度為332.206ug/ml。

工作液  分別取標準儲備液2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml、15ml于25ml棕色容量瓶中，加入1.6ml的PdCl_2,用鹽酸定容至刻度，并搖勻。

靜置30min后，用同濃度的PdCl₂溶液作空白對照，在波長380nm處測定吸光度A。結果表明，吸光度A與林可霉素的濃度C成良好的線性關系。線性回歸方程如下：

A＝4.2556*C＋0.0001（R²=0.9996, 26.6～199.3μg/ml）

2.3 回收率試驗

二個水平三個重復的回收率試驗見表1。.

表1 飼料添加林可霉素回收率

2.4 樣品的測定

    準確稱取樣品0.2g左右于100ml棕色容量瓶中，加水溶解，超聲溶解30min。然后加水定容至刻度，搖勻。過濾，取濾液15ml于25ml容量瓶中，同2.2同法配制并且檢測吸光度A。結果見表2。

表2 樣品測定結果（n＝3）

3.   討論

    林可霉素與鈀鹽形成穩(wěn)定配合物，在380nm波長處有最大吸收，而鹽酸溶液在380nm處幾乎沒有吸收，測定結果與高效液相色譜測定結果接近，相對誤差不超過3％。本法選用同濃度的PdCl₂鹽酸溶液作空白對照，可以測定林可霉素的含量。實驗證明方法簡捷，結果準確，適用于飼料企業(yè)對藥物添加劑的質量控制。